Jiachang Biological - biotechnology services and research and development as one of the high-tech enterprises
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细胞治疗产品来源多样、生物学特性复杂。间充质干细胞、NK细胞、CAR-T细胞、诱导多功能干细胞等不同类别细胞治疗产品的生产过程都会涉及细胞的离体培养。而细胞离体培养必然会涉及生物学属性的变化、生物学安全性改变、外源性污染、交叉污染等问题，这些问题严重影响研发初始到生产过程的进展和成功。
根据《细胞治疗产品研究与评价技术指导原则》、《人源性干细胞产品药学研究与评价技术指导原则（试行）》、《基因修饰细胞治疗产品非临床研究与评价技术指导原则（试行）》等指南要求，研究者需建立各类细胞治疗产品质量控制策略。质量控制一般应考虑鉴别、生物学效力、纯度、杂质、细胞数量（活细胞数、功能细胞数等）和一般安全性检测（如无菌、支原体、内毒素、外观、除细胞数之外的其他外源性异物等）等。同时也要根据细胞治疗产品特性，质量研究和检查应涵盖细胞特性分析、特定病毒和非特定病毒检测、病毒载体回复突变（复制性病毒检测）、生物学活性（明确产品与临床治疗相关的生物学效应和作用机制）等。
珈创生物可提供细胞基因疗法（CGT）产品的综合质量检测服务。
针对如间充质干细胞产品这类非基因编辑细胞治疗产品，珈创生物可提供：
1、微生物学安全性检测，建立从原辅料、起始原物料（如生产用细胞、菌毒种等）到产品的各方面质量安全控制方案，确保各类细胞及细胞产品满足无细菌、真菌、支原体、病毒污染，以及无微生物代谢产物污染的质量要求；
2、生物学安全性检测，建立风险预测或排除细胞治疗产品进入人体后产生成瘤性、异常免疫反应、分化等安全性问题；
3、生物学属性检测，如细胞鉴别、活性、纯度和均一性等生物学属性评价，降低各类细胞治疗产品因其本身具有的多样性、异质性、复杂性等特点带来的风险；
4、生物学有效性检测，如诱导分化能力、免疫学反应、相关活性物质分泌等来预测临床治疗效应。
针对如CAR-T细胞这类基因编辑的免疫细胞治疗产品，除上述一般性的细胞质量控制检项外，还需考虑生产质粒的菌种，质粒、慢病毒以及特殊生产工艺中引入的其他风险，如慢病毒载体回复突变（RCL检测）、对靶细胞的效应、分泌特定因子、工艺相关杂质（磁珠等）和产品相关杂质（如非功能杂细胞群等）检测等。
珈创生物细胞治疗产品技术服务检测项目总表
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序号 |
类别(产品/项目/参数) |
产品/项目/参数 |
依据的标准（方法）名称及编号（含年号） |
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序号 |
名 称 |
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1 |
细胞鉴别试验 |
1.1 |
同工酶试验 |
生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程《中国药典》2020年版三部， 生物制品生产检定用菌毒种管理及质量控制、 生物制品生产检定用动物细胞基质制备及质量控制、生物制品病毒安全性控制《中国药典》2020年版三部 Code of Federal Regulation Title 9（9 CFR） Guidance for Industry :Characterization and Qualification of Cell Substrates and Other Biological Materials Used in the Production of Viral Vaccines for Infectious Disease Indications |
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1.2 |
染色体核型分析法 |
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1.3 |
STR分析法 |
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1.4 |
细胞形态观察法 |
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1.5 |
细胞表面标记物检测--流式细胞术 |
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1.6 |
DNA条形码法 |
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1.7 |
种属鉴定-- PCR法 |
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1.8 |
RAPD法（随机扩增多态性DNA） |
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2 |
无菌检查 |
2.1 |
细菌、真菌无菌检查--薄膜过滤法 |
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2.2 |
细菌、真菌无菌检查--直接接种法 |
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2.3 |
分枝杆菌检查法 |
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3 |
支原体检查 |
3.1 |
支原体检查--琼脂培养法 |
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3.2 |
支原体检查--液体培养法 |
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3.3 |
支原体检查--DNA染色法 |
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4 |
内、外源病毒因子检查 |
4.1 |
细胞形态观察及血吸附试验 |
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4.2 |
体外不同指示细胞接种培养法 |
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4.3 |
动物体内接种法 |
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4.3.1 |
乳鼠脑内及腹腔接种法 |
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4.3.2 |
小鼠脑内及腹腔接种法 |
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4.3.3 |
豚鼠腹腔接种法 |
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4.3.4 |
家兔皮内及皮下接种法 |
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4.4 |
鸡胚接种法 |
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4.4.1 |
鸡胚卵黄囊接种法 |
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4.4.2 |
鸡胚尿囊腔接种及尿囊液血凝试验 |
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4.5.1 |
逆转录病毒检测--逆转录酶活性测定法 |
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4.5.2 |
逆转录病毒检测--透射电镜观察法 |
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4.5.3 |
逆转录病毒检测--感染性试验 |
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4.5.4 |
逆转录病毒样颗粒定量--透射电镜法 |
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4.5.5 |
逆转录病毒样颗粒定量--Q-PCR法 |
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4.6.1 |
鼠源性病毒检测--细胞试验 |
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4.6.2 |
鼠源性病毒检测--动物抗体产生试验 |
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4.6.3 |
鼠源性病毒检测--鸡胚感染试验 |
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4.6.4 |
鼠源性病毒检测--Q-PCR法 |
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4.7.1 |
人源病毒检测--免疫荧光法 |
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4.7.2 |
人源病毒检测--Q-PCR法 |
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4.8.1 |
牛源性病毒检测--细胞培养法 |
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4.8.2 |
牛源性病毒检测--荧光抗体检测法 |
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4.8.3 |
牛源性病毒检测--Q-PCR法 |
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4.9.1 |
鼠细小病毒检测--细胞培养法 |
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4.9.2 |
鼠细小病毒检测--Q-PCR法 |
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4.10.1 |
猪源性病毒检测--细胞培养法 |
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4.10.2 |
猪源性病毒检测--荧光抗体检测法 |
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4.10.3 |
猪源性病毒检测--Q- PCR法 |
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4.11.1 |
杯状病毒（Vesivirus 2117）检测--Q- PCR法 |
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5 |
成瘤性检查 |
5.1 |
动物体内接种法 |
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5.2 |
软琼脂克隆形成试验 |
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5.3 |
端粒酶活性检测--Q-PCR法 |
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6 |
致瘤性检查 |
6.1 |
动物体内接种法 |
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7 |
免疫学反应检测 |
7.1 |
淋巴细胞增殖抑制试验 |
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7.2 |
特定淋巴细胞亚群检测法（Th1,Th17,Treg） |
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7.3 |
淋巴细胞分泌TNF-α抑制试验 |
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8 |
生物学有效性评价 |
8.1 |
成骨细胞分化试验 |
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8.2 |
成软骨细胞分化试验 |
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8.3 |
成脂细胞分化试验 |
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9 |
细胞活性检测 |
9.1 |
细胞计数和细胞存活率检测法 |
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9.2 |
细胞生长曲线测定法 |
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9.3 |
细胞周期测定--PI染色法 |
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10 |
残留物检测 |
10.1 |
牛血清白蛋白残留检测法 |
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10.2 |
抗生素残留检测--培养法 |
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10.3 |
抗生素残留检测--酶联免疫法 |
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10.4 |
磁珠残留 |
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10.5 |
Human IL-2残留 |
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11 |
噬菌体污染检查 |
11.1 |
透射电镜观察--负染色法 |
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11.2 |
培养观察--噬斑法 |
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12 |
菌种鉴定 |
12.1 |
菌株染色观察--普通染色法 |
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12.2 |
菌株染色观察--革兰氏染色法 |
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12.3 |
菌落形态观察-培养法 |
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12.4 |
菌株抗生素抗性试验-培养法 |
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12.5 |
菌株生化特征分析--生化反应试验 |
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12.6 |
16SrRNA分析法 |
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12.7 |
18SrRNA分析法 |
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12.8 |
26SrRNA分析法 |
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12.9 |
ITS序列分析法 |
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13 |
细菌内毒素检测 |
13.1 |
凝胶法 |
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14 |
可复制型病毒检测 |
14.1 |
复制性逆转录病毒检测--细胞培养和 Q- PCR法 |
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14.2 |
复制性慢病毒检测--细胞培养和 Q- PCR/ELISA法 |
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15 |
细胞制剂检测 |
CAR+T细胞比例 CD3+细胞比例 生物学活性 磁珠残留 Human IL-2残留 NK细胞自然杀伤活性检测 NK细胞ADCC功能检测 NK激活性和抑制性受体检测GzmB,perforin,CD107表达水平检测 |
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16 |
其他检测项目 |
流式细胞术的绝对细胞计数方法 CCK-8法则定细胞群体倍增时间 细胞克隆形成率检测方法 MSC急性毒性及抗GVHD效果评价 基于RPA-cas技术的口腔支原体检测 基于LAMP技术的肺炎支原体的可视化检测 Lb-cas12a蛋白的原核表达及纯化 基于CRISPRCas系统的多种支原体核酸检测 mRNA含量ribogreen荧光检测 mRNA疫苗总抗体滴度ELISA检测法 mRNA疫苗中和抗体效价假病毒中和试验检测法 dsRNA杂质ELISA检测法 马源性病毒检查（3种） 禽源性病毒检查（3种） 昆虫细胞CO1条形码分析法 昆虫细胞螺原体qPCR检测 昆虫杆状病毒检测 昆虫黄病毒检测 昆虫诺达病毒检测 昆虫弹状病毒（内源性/外源性）检测 SV40大T抗原核酸序列检测 腺病毒5型EIA基因检测 胎畸瘤形成试验 |
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