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3、 指示病毒选择

    指示病毒可分为“相关”病毒（如人血液制品可能携带的人类病毒 HAV、HBV、HIV 和 B19 等）、特异“模型”病毒（如 CHO 表达系统的 MVM、x-MuLV 病毒，杆状病毒表达系统的 BV 病毒等）和非特异“模型”病毒（如 CHO 表达系统的 PRV 和 Reo3 病毒）三类，应优先选择与潜在污染病毒密切相关的病毒，如相关病毒不能获取或不适于体外培养，可采用特异“模型”病毒代替。
    评价病毒清除的总能力时，应选择具有不同特性的非特异性模型病毒，包括 DNA/RNA、有/无包膜、颗粒大小、尤其对物理/化学处理明显耐受的病毒等指示病毒需有足够高的滴度，同时所选指示病毒不能对操作人员和环境造成生物危害。
    验证平台拥有丰富的病毒毒种毒株，且背景清楚，纯度高，滴度可达 8~9Log10/ml。表 1 列出了 CHO 表达制品工艺验证最常用四种指示病毒：

表 1 病毒清除工艺验证中常用指示病毒性质

病毒名称	病毒特性	检测方法	病毒滴度 Log10/ml
Reo3（呼肠孤病毒）	双链 RNA 病毒，无包膜，抗性中50-70nm	TCID50 Q-PCR	8-9
MVM（鼠细小病毒 ）	单链 DNA 病毒无包膜，抗性极高 18-26nm	TCID50 Q-PCR	8.5-9.5
PRV(伪狂病毒)	双链 DNA 病毒有包膜，抗性中120-200nm	TCID50 Q-PCR	8-9
MuLv （鼠白血病病毒）	单链 RNA 病毒有包膜，抗性低 80-120nm	TCID50 Q-PCR	7.5-8.5
BV (杆状病毒)	双链 DNA病毒有包膜 45×275nm	TCID50 Q-PCR	8-9
POL-1 (人脊髓灰质炎I型病毒)	单链 RNA 病毒无包膜，抗性中 25-30nm	TCID50	8-9
VSV (水疱性口炎病毒)	单链 RNA 病毒有包膜，抗性低 70×150nm	TCID50 Q-PCR	8-9
PPV （猪细小病毒）	单链 DNA 病毒无包膜，抗性高 18-24nm	TCID50 Q-PCR	7.5-8.5
HAdV-5 (人腺病毒5型)	双链 DNA 病毒无包膜，抗性低 70-90nm	TCID50	8.5-9.5
BPIV-3 （牛副流感病毒3型）	单链 RNA 病毒有包膜，抗性低 150-200nm	TCID50	8-9